Preview

Вестник урологии

Расширенный поиск

Иммунологические аспекты диагностики рака предстательной железы

https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-4-42-48

Полный текст:

Аннотация

Актуальность. Своевременная диагностика рака предстательной железы имеет решающее значение для дальнейшей судьбы пациента. Затруднения при гистологической верификации окончательного диагноза и ложно-отрицательные результаты биопсийного исследования зачастую связаны со сходством микроморфологической картины аденокарциномы простаты и её доброкачественными поражениями.

Цель исследования. Изучение возможностей ИГХ-идентификации опухолевых клеток и базального эпителиального слоя железистых структур простаты при подозрении на рак предстательной железы.

Материалы и методы. Исследовался биопсийный материал, взятый у 134 больных. В 72 образцах рутинным гистологическим исследованием была верифицирована аденокарцинома простаты, в 62 – признаки злокачественного перерождения отсутствовали. Впоследствии выполнялся иммуногистохимический анализ биоптатов с применением антител к α-метилацил-КоА-рацемазе, ядерному белку р63 и высокомолекулярному цитокератину.

Результаты. При аденокарциноме предстательной железы наблюдается AMACR-положительная реакция малигнизированных клеток и отрицательное реагирование базального эпителия на антитела к р63 и высокомолекулярному цитокератину.

Заключение. При подозрении на рак предстательной железы иммуногистохимические исследования с моноклональными антителами к AMACR, р63 и высокомолекулярному цитокератину существенно облегчают выявление специфических критериев аденокарциномы.

Для цитирования:


Попов С.В., Гусейнов Р.Г., Орлов И.Н., Протощак В.В., Скрябин О.Н., Бабкин П.А., Багров Ф.А., Катунин А.С., Мартов А.Г., Щукин В.Л. Иммунологические аспекты диагностики рака предстательной железы. Вестник урологии. 2018;6(4):42-48. https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-4-42-48

For citation:


Popov S.V., Guseinov R.G., Orlov I.N., Protoshchak V.V., Skryabin O.N., Babkin P.A., Bagrov F.A., Katunin A.S., Martov A.G., Schukin V.L. Prostate cancer diagnosis: an immunological aspects. Urology Herald. 2018;6(4):42-48. (In Russ.) https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-4-42-48

Введение

В контексте проблемы раннего выявления рака предстательной железы трудно переоценить значимость простато-специфического анти­гена и сопряжённых с ним показателей, а также роль современных визуализационных технологий. Тем не менее, «золотым стандартом» и единственным ин­струментом верификации диагноза РПЖ остаётся гистологический анализ структурных особенностей про­статы [1][2].

Важнейшей причиной диагностических ошибок при гистологическом исследовании является сход­ство микроморфологической симптоматики РПЖ с таковой для других форм патологии, обусловленных воспалением, гипо- или гипербиотическими процес­сами, доброкачественным опухолевым ростом. Таким образом, выявление аденокарцином может быть за­труднено вследствие их маскировки картиной добро­качественных нарушений.

Простатическая интраэпителиальная неоплазия (ПИН) высокой степени, а также нахождение в пре­паратах участков атипичной мелкоацинарной проли­ферации (ASAP) становятся показаниями к повторной биопсии [3].

Получение биоптатов простаты для гистологи­ческого исследования в настоящее время перешло в категорию рутинных процедур и выполняется как в условиях стационара, так и амбулаторно. Но, несмо­тря на это, биопсия все равно остаётся инвазивным методом. Болевые ощущения, гематурия, инфекция мочевой системы, дизурия, различные вазовагальные реакции, нарушения сексуальной функции и др. могут развиться непосредственно после процедуры и в бо­лее поздние сроки.

Усовершенствование методов гистологического ана­лиза биопсийного материала позволит уменьшить веро­ятность получения ложно-отрицательных результатов, сократить численность повторных биопсий, обеспечить своевременность начала лечебных мероприятий [4].

Затруднения в верификации диагноза аденокар­циномы простаты могут возникнуть в силу различных обстоятельств. Например, участки ASAP, встречаю­щиеся в 1-9% всех биопсий предстательной железы, маскируют аденокарциному в 18-75% случаев [5][6][7]. Наличие мелких (менее 1 мм) очагов, ПИН высокой степени также могут стать причиной ложно-отрица­тельного результата исследования [8].

К одному из признаков (критериев) морфологиче­ского атипизма при злокачественном перерождении клеток относится отсутствие базальных клеток желе­зистого аппарата предстательной железы [9].

Иммуногистохимический (ИГХ) метод изучения микроморфологической картины заболевания с при­менением антител клона 34βE12 и моноклональных антител к ядерному белку р63 позволяет, детализируя состояние базального эпителиального слоя желези­стых структур простаты, подтвердить или опровер­гнуть наличие аденокарциномы [10].

Антигеном для антител клона 34βE12 является вы­сокомолекулярный цитокертин (ВЦК), образующийся в немалигнизированных базальных эпителиоцитах простаты. Феномен ингибирования экспрессии ВЦК после злокачественного перерождения этих клеток может быть использован при ИГХ-диагностике адено­карциномы предстательной железы [11][12].

Малигнизация железистого базального эпите­лия также приводит к подавлению в нем биосинтеза ядерного белка р63, поэтому результаты теста с моно­клональными антителами к р63 позволяют судить о состоянии базальных эпителиоцитов, доброкаче­ственности или злокачественности нарушений ткане­вого роста [13][14][15].

Фермент α-метилацил-КоА-рацемаза (AMACR) яв­ляется продуктом экспрессии гена р504Б и участвует в β-окислении жирных кислот. AMACR образуется в митохондриях и пероксисомах малигнизированных клеток и в настоящее время расценивается как пер­спективный маркер аденокарциномы предстательной железы [6].

Целью настоящего исследования явилось изуче­ние возможностей ИГХ-идентификации опухолевых клеток и базального эпителиального слоя железистых структур простаты при подозрении на рак предста­тельной железы.

Материалы и методы

Материалом для исследования послужил биоп­сийный материал, взятый у 134 больных, находивших­ся на стационарном лечении в урологическом отделе­нии СПб ГБУЗ Клинической больницы Святителя Луки в период с 2015 по 2017 гг.

Подбор биоптатов осуществляли в соответствии с поставленной целью, для чего ориентировались на результаты гистологического изучения микропрепа­ратов, окрашенных гематоксилин-эозином. Таким об­разом, отобранный биопсийный материал был разде­лен на 2 группы.

В основную группу № 1 относили образцы ткани простаты, пораженные аденокарциномой (n=72), в группу № 2 - образцы здоровой ткани (n=62).

По завершении подготовительного этапа ис­следований (приготовление парафиновых блоков, окрашивание срезов толщиной 5 мкм гематоксилинэозином, затем непосредственно гистологическое исследование и разделение на группы) переходили к иммуногистохимическому анализу с применением моноклональных антител BioGenex к α-метилацил- КоА-рацемазе, ядерному белку р63 и высокомолеку­лярному цитокератину (антитела клона 34βE12).

В процессе ИГХ-анализа обращали внимание на экстенсивность и интенсивность окрашивания для AMACR, 34βE12 и ядерного р63.

Для статистической обработки полученных данных применяли пакет прикладных программ «STATISTICA 7», «Microsoft Excel 2010».

Результаты исследования

У пациентов основной группы, биоптаты которых содержали очаги опухолевого роста, концентрация ПСА в сыворотке крови равнялась в среднем 24,34 нг/мл (медиана 21,06 нг/мл, диапазон от 3,26 нг/мл до 63,46 нг/мл). В группе контроля средний сыворо­точный уровень ПСА составил 8,54 нг/мл с медианой, равной 6,35 нг/мл и вариабельностью от 1,36 нг/мл до 14,62 нг/мл.

Средний возраст пациентов основной группы, у которых при рутинном гистологическом исследовании была верифицирована аденокарцинома предстатель­ной железы, составил 58-84 года (медиана 67,2 лет). В группе контроля возраст обследованных варьировал от 55 до 68 лет, медиана была равна 62,5 лет.

Уровни экстенсивности и интенсивности иммун­ногистохимического окрашивания для AMACR, 34βΕ12 и ядерного р63 в основной и контрольной группах по­казаны в таблице 1.

Экстенсивность иммунной окраски для AMACR в образцах малигнизированной ткани превысила 90% в 76,39% случаев; преобладала высокая и умеренная интенсивность окрашивания. 98,39% доброкачествен­ных тканей не изменяли окраску в ответ на воздей­ствие поликлональных антител к AMACR.

Во всех микропрепаратах тканей предстательной железы поражённых аденокарциномой, практически отсутствовала реакция на антитела клона 34βΕ12 и моноклональные антитела к р63, в единичных случа­ях отмечалось слабое или, более редко, умеренное окрашивание (табл. 1).

 

Таблица 1. Выраженность экстенсивности и интенсивности иммуногистохимического окрашивания ткани простаты, пораженной аденокарциномой (группа №1) и доброкачественным процессом (группа №2)

Table 1. Expressiveness of the extensiveness and intensity of prostate tissue immunohistochemical staining affected by adenocarcinoma (group 1) and a benign process (group 2)

Выраженность признака

Expressiveness of signs

Группы биопсийного материала

Biopsy groups

№ 1 (n=72)

№ 2 (n=62)

 

Иммуногистохимический маркёр аденокарциномы Immunohistochemical marker for adenocarcinoma

 

AMACP

34βΕ12

p63 

AMACP

34βΕ12

p63

Экстенсивность иммунного окрашивания Extensiveness immunostaining

>90%

55(76,39%)

-

-

-

36(58,06%)

13(20,97%)

50-90%

9(12,50%)

1(1,39%)

-

-

20(32,26%)

29(46,77%)

10-50%

3(4,17%)

2(2,78%)

2(2,78%) 

1(1,61%)

6(9,68%)

14(22,58%)

<10%

-

-

--

-

-

3(4,84%)

0

5(6,94%)

69(95,83%)

70(97,22%) 

61(98,39%)

-

3(4,84%)

Интенсивность иммунного окрашивания

Intensity of immune staining

-

7(9,72%)

69(95,83%)

70(97,22%) 

61(98,39%)

-

6(9,68%)

Слабая

Mild

3(4,17%)

2(2,78%)

2(2,78%) 

-

1(1,61%)

6(9,68%)

Умеренная

Moderate

24(33,33%)

1(1,39%)

1(1,61%)

8(12,90%)

37(59,68%)

Сильная

Strong

38(52,78%)

-

-

-

53(85,48%)

13(20,97%)

Примечания: n - численность образцов в отдельной группе

Notes: n - is the number of samples in a separate group

Обсуждение

При воздействии поликлональных антител к α-метилацил-КоА-рацемазе на клетки аденокарци­номы, интенсивно продуцирующие AMACR, о со­стоявшейся иммунной реакции между антителами и AMACR свидетельствует появление коричневого окрашивания опухолевых клеток. В нашем исследо­вании данный признак проявился в 93,06% случаев с преимущественно высокой или умеренной интенсив­ностью окраски. Напротив, в здоровой ткани предста­тельной железы реакция на антитела к AMACR практи­чески отсутствовала. Аналогичные данные получили в 2002 году R. Beach et al., Z. Jiang et al., Yang XJ et al., в 2005 году - O. Hameed et al., в 2011 году - C. Boran et al. [15 - 19].

Однако, очевидно, что положительные результа­ты теста на рацемазу при ИГХ-выявлении аденокар­циномы простаты не следует считать абсолютными критериями верификации РПЖ. Согласно литератур­ным данным, иммунная реакция на антитела к AMACR может развиваться в условиях простатической интраэ- пителиальной неоплазии высокой степени и атипиче­ской аденоматозной гиперплазии со встречаемостью до 15-20% [19, 20]. Чувствительность AMACR-пробы существенно понижена при атрофических и псевдоги- перпластических формах ацинарной аденокарцино­мы предстательной железы [21, 22].

Результаты проведенного нами исследования позволяют с высокой вероятностью предположить, что иммуногистохимическое тестирование образцов ткани простаты с антителами клона 34βΕ12 и моно­клональными антителами к р63 является надежным способом выявления и оценки состояния базального эпителиоцитарного слоя железистых структур про­статы при подозрении на аденокарциному. Такого же мнения придерживаются S. SignoreW et al. (2000), N.A. Abrahams et al. (2002), K.R.M. Leite et al. (2010) и дру­гие авторы [13, 23, 24].

Заключение

При подозрении на рак предстательной железы иммуногистохимические исследования с монокло­нальными антителами к AMACR, р63 и высокомоле­кулярному цитокератину облегчают выявление та­ких критериев аденокарциномы, как формирование разрастаний малигнизированного эпителия проста­тических желез и утрата базального слоя здоровых эпителиоцитов. Качество визуализации микроморфо- логической картины повышается за счет выделения цветом объектов диагностического поиска с возмож­ностью полуколичественной оценки выраженности поражения. Некоторая ограниченность специфично­сти AMACR-теста (возможно окрашивание участков с ПИН или атипической аденоматозной гиперплазией) нивелируется одновременным иммунным реагирова­нием ядерного р63 и высокомолекулярного цитокера­тина с соответствующими антителами и детализацией вследствие этого состояния базального слоя.

Список литературы

1. Аль-Шукри С.Х., Боровец С.Ю., Рыбалов М. А. Ошибки диагностики и стадирования рака предстательной железы. Урологические ведомости. 2013;3(1):23-27.

2. Herawi M, Parwani AV, Irie J, Epstein JI. Small Glandular Proliferations on Needle Biopsies, Most Common Benign Mimickers of Prostatic Adenocarcinoma Sent in for Expert Second Opinion. Am J Surg Pathol. 2005;29(7):874-880. PMID: 15958851

3. Пушкарь Д.Ю., Говоров А.В. Биопсия предстательной железы. М., «ГЭОТАР-Медиа», 2010.

4. Singh V, Manu V1, Malik A, Dutta V, Mani NS, Patrikar S. Diagnostic utility of p63 and α-methyl acyl Co A racemase in resolving suspicious foci in prostatic needle biopsy and transurethral resection of prostate specimens. J Cancer Res Ther. 2014;10(3):686-92. DOI: 10.4103/0973-1482.138194

5. Iczkowski KA, Chen HM, Yang XJ, Beach RA. Prostate cancer diagnosed after initial biopsy with atypical small acinar proliferation suspicious for malignancy is similar to cancer found on initial biopsy. Urology. 2002;60(5):851-854. PMID: 12429314

6. Molinié V, Fromont G, Sibony M, Vieillefond A, Vassiliu V, Cochand-Priollet B, Hervé JM, Lebret T, Baglin AC. Diagnos-tic utility of a p63/α-methyl coenzyme A racemase (p504s) cocktail in ambiguous lesions of the prostate upon needle biopsy. BJU Int. 2006;97(5):1109-1115. DOI: 10.1038/modpathol.3800197

7. Dickinson SI. Premalignant And Malignant Prostate Lesions: 1. Pathologic Review. Cancer Control. 2010;17(4):214-22. DOI: 10.1177/107327481001700402

8. Hameed O, Humphrey PA. Pseudoneoplastic mimics of prostate and bladder carcinomas. Arch Pathol Lab Med. 2010;134(3):427-443. DOI: 10.1043/1543-2165-134.3.427

9. Ковылина М.В. Опухолевые заболевания мочеполовых органов. Современные возможности гистоморфологической оценки биоптатов предстательной железы: актуальность проблемы. Онкоурология. 2004;6(7).

10. Kalantari MR, Anvari K, Jabbari H, Tabrizi FV. p63 is more sensitive and specifi c than 34βE12 to diff erentiate adeno carcinoma of prostate from cancer mimickers. Iran J. Basic Med. Sci. 2014;17(7):497-501. PMCID: PMC4242919

11. O’Malley FP, Grignon DJ, Shum DT. Usefulness of immunoperoxidase staining with high-molecular-weight cytokeratin in the diff erential diagnosis of small-acinar lesions of the prostate gland. Virchows Arch. A. Pathol. Anat. Histopathol. 1990;417:191-196. PMID: 1696762

12. Wojno KJ, Epstein JI. The utility of basal cell-specifi c anti- cytokeratin antibody (34 beta E12) in the diagnosis of prostate cancer. A review of 228 cases. Am. J. Surg. Pathol. 1995;19:251-260. PMID: 7532918

13. Signoretti S, Waltregny D, Dilks J, Isaac B, Lin D, Garraway L, Yang A, Montironi R, McKeon F, Loda M. p63 is a prostate basal cell marker and is required for prostate development. Am J Pathol. 2000;157(6):1769-1775. DOI: 10.1016/S0002-9440(10)64814-6

14. Barbareschi M, Pecciarini L, Cangi MG, Macrì E, Rizzo A, Viale G, Doglioni C. P63, a p53 homologue, is a selective nuclear marker of myoepithelial cells of the human breast. Am J Surg Pathol. 2001;25(8):1054-1060. PMID: 11474290

15. Hameed O, Sublett J, Humphrey PA. Immunohistochemical stains for p63 and alpha-methylacyl-CoA racemase, versus a cocktail comprising both, in the diagnosis of prostatic carcinoma: a comparison of the immunohistochemical staining of 430 foci in radical prostatectomy and needle biopsy tissues. Am. J. Surg. Pathol. 2005;29(5):579-587. PMID: 15832080

16. Beach R, Gown AM, De Peralta-Venturina MN, Folpe AL, Yaziji H, Salles PG, Grignon DJ, Fanger GR, Amin MB. P504S immunohistochemical detection in 405 prostatic specimens including 376 18-gauge needle biopsies. Am. J. Surg. Pathol. 2002;26(12):1588-1596. PMID: 12459625

17. Jiang Z, Woda BA, Rock KL, Xu Y, Savas L, Khan A, Pihan G, Cai F, Babcook JS, Rathanaswami P, Reed SG, Xu J, Fanger GR. P504S: a new molecular marker for the detection of prostate carcinoma. Am J Surg Pathol. 2001;25(11):1397-13404. PMID: 11684956

18. Yang XJ, Wu CL, Woda BA, Dresser K, Tretiakova M, Fanger GR, Jiang Z. Expression of alphamethylacyl-CoA racemase (P504S) in atypical adenomatous hyperplasia of the prostate. Am J Surg Pathol. 2002;26(7):921-925. PMID: 12131160

19. Boran C, Kandirali E, Yilmaz F, Serin E, Akyol M. Reliability of the 34βE12, keratin 5/6, p63, bcl-2, and AMACR in the diagnosis of prostate carcinoma. Urol Oncol. 2011;29(6):614-623. DOI: 10.1016/j.urolonc.2009.11.013.

20. Jiang Z, Wu CL, Woda BA, Dresser K, Xu J, Fanger GR, Yang XJ. P504S/alphamethylacyl-CoA racemase: a useful marker for diagnosis of small foci of prostatic carcinoma on needle biopsy. Am J Surg Pathol. 2002;26(9):1169-1174. PMID: 12218573

21. Zhou M, Jiang Z, Epstein JI. Expression and diagnostic utility of alpha-methylacyl-CoA-racemase (P504S) in foamy gland and pseudohyperplastic prostate cancer. Am J Surg Pathol. 2003;27(6):772-778. PMID: 12766580

22. Farinola MA, Epstein JI. Utility of immunohistochemistry for alpha-methylacyl-CoA racemase in distinguishing atrophic prostate cancer from benign atrophy. Hum Pathol. 2004;35(10):1272-1278. PMID: 15492996

23. Abrahams NA, Ormsby AH, Brainard J. Validation of cytokeratin 5/6 as an eff ective substitute for keratin 903 in the diff erentiation of benign from malignant glands in prostate needle. Histopathology. 2002;41(1):35-41. PMID: 12121235

24. Leite KR, Srougi M, Sanudo A, Dall’oglio MF, Nesrallah A, Antunes AA, Cury J, Camara-Lopes LH. The use of immunohistochemistry for diagnosis of prostate cancer. Int Braz J Urol. 2010;36(5):583-590. PMID: 21044375


Об авторах

С. В. Попов
СПб ГБУЗ Клиническая больница Святителя Луки.
Россия

Попов Сергей Валерьевич – д.м.н., доцент; главный врач, руководитель центра эндоскопической урологии и новых технологий.

Санкт – Петербург.



Р. Г. Гусейнов
СПб ГБУЗ Клиническая больница Святителя Луки.
Россия

Гусейнов Руслан Гусейнович – заведующий урологическим отделением №2.

Санкт – Петербург.


И. Н. Орлов
СПб ГБУЗ Клиническая больница Святителя Луки.
Россия

Орлов Игорь Николаевич – к.м.н., заведующий урологическим отделением №1.

Санкт – Петербург.


В. В. Протощак
ФГБОУ ВО «Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова» МО РФ.
Россия

Протощак Владимир Владимирович – д.м.н., профессор; главный уролог МО РФ – начальник кафедры урологии.

Санкт – Петербург.


О. Н. Скрябин
СПб ГБУЗ Клиническая больница Святителя Луки.
Россия

Скрябин Олег Николаевич – д.м.н., профессор; главный онколог; научный руководитель центра эндоскопической урологии и новых технологий.

Санкт – Петербург.


П. А. Бабкин
ФГБОУ ВО «Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова» МО РФ.
Россия

Бабкин Павел Александрович – д.м.н., профессор; профессор кафедры урологии.

Санкт – Петербург.


Ф. А. Багров
СПб ГБУЗ Клиническая больница Святителя Луки.
Россия

Багров Филипп Александрович – врач-уролог.

Санкт – Петербург.



А. С. Катунин
СПб ГБУЗ Клиническая больница Святителя Луки.
Россия

Катунин Александр Сергеевич – врач-уролог.

Санкт – Петербург.



А. Г. Мартов
ФГБУ ГНЦ ФМБЦ им. А. И. Бурназяна ФМБА России.
Россия

Мартов Алексей Георгиевич – д.м.н., профессор; заведующий кафедрой урологии.

Москва.


В. Л. Щукин
СПб ГБУЗ Городская больница №20.
Россия

Щукин Виктор Леонидович – врач-уролог.

Санкт – Петербург.



Для цитирования:


Попов С.В., Гусейнов Р.Г., Орлов И.Н., Протощак В.В., Скрябин О.Н., Бабкин П.А., Багров Ф.А., Катунин А.С., Мартов А.Г., Щукин В.Л. Иммунологические аспекты диагностики рака предстательной железы. Вестник урологии. 2018;6(4):42-48. https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-4-42-48

For citation:


Popov S.V., Guseinov R.G., Orlov I.N., Protoshchak V.V., Skryabin O.N., Babkin P.A., Bagrov F.A., Katunin A.S., Martov A.G., Schukin V.L. Prostate cancer diagnosis: an immunological aspects. Urology Herald. 2018;6(4):42-48. (In Russ.) https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-4-42-48

Просмотров: 460


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2308-6424 (Online)