Preview

Вестник урологии

Расширенный поиск

КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ ФУНКЦИИ ЭНДОТЕЛИЯ В ПОЧКЕ ДИСТАНТНЫМ ИШЕМИЧЕСКИМ И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИМ ПРЕКОНДИЦИОНИРОВАНИЕМ ПРИ ТЕПЛОВОЙ ИШЕМИИ

https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-2-4-12

Полный текст:

Аннотация

В работе представлены результаты исследования нарушений функции эндотелия, возникающих при моделировании «тепловой ишемии» почки и возможности их коррекции дистантным ишемическими и фармакологическим прекондиционированием. Моделирование «тепловой ишемии» почки характеризуется нарушением микроциркуляции и экспрессией eNOS в ткани почек. Применение дистантного ишемического прекондиционирования и ингибиторов фосфодиэстеразы 5 типа силденафила и тадалафила приводит к выраженной коррекции нарушений микроциркуляции и активности eNOS. При моделировании «тепловой ишемии» почки на фоне дисфункции эндотелия вызванной ADMA-подобным L-NAME индуцированным дефицитом оксида азота наблюдаются более выраженные нарушения микроциркуляции и активности eNOS. Применение дистантного ишемического и фармакологического прекондиционирования ингибиторами фосфодиэстеразы 5 типа при данном типе патологии приводило к выраженной коррекции нарушений микроциркуляции и активности eNOS. Введение блокатора АТФ-зависимых К+ каналов глибенкламида при коррекции дистантным ишемическим и фармакологическим прекондиционированием нарушений, вызванных моделированием «тепловой ишемии» почки, приводит к снижению их эффективности.

Раскрытие информации: Исследование не имело спонсорской поддержки. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Для цитирования:


Братчиков О.И., Покровский М.В., Елагин В.В., Костина Д.А. КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ ФУНКЦИИ ЭНДОТЕЛИЯ В ПОЧКЕ ДИСТАНТНЫМ ИШЕМИЧЕСКИМ И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИМ ПРЕКОНДИЦИОНИРОВАНИЕМ ПРИ ТЕПЛОВОЙ ИШЕМИИ. Вестник урологии. 2018;6(2):4-12. https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-2-4-12

For citation:


Bratchikov O.I., Pokrovskiy M.V., Elagin V.V., Kostina D.A. THE CORRECTION OF ENDOTHELIAL DYSFUNCTION WITH THE HELP OF DISTANT ISCHEMIC AND PHARMACOLOGICAL PRECONDITIONING WITH THERMAL LOCAL ASPHYXIA OF KIDNEY. Urology Herald. 2018;6(2):4-12. (In Russ.) https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-2-4-12

Введение

В современной хирургии, с развитием оперативных вмешательств, требующих временного прекращения кровотока по определенным сосудам на одной из лидирующих позиций стоит проблема ишемических и реперфузионных повреждений органов и тканей. Особое место в этом отношении занимает тепловая ише­мия почки, при которой расширение временного интервала обескровливания органа имеет прин­ципиальное значение. Одним из способов повы­шения резистентности органов к дефициту кис­лорода является физиологическое воздействие на систему регуляции клеточного метаболизма путем периодического создания условий умерен­ного дефицита кислорода. В эксперименте давно доказан «тренирующий» эффект периодической гипоксии, адаптирующей организм животного к условиям недостатка кислорода. В механизме этой адаптации важную роль играют как реакции на уровне организма (гипервентиляция, активиза­ция деятельности сердца, усиление эритропоэза и др.), так и модификация клеточного метаболизма (активизация гликолиза, повышение способности утилизировать кислород при его низком содер­жании, увеличение мощности антиоксидантной системы клеточной защиты и др.). В результате, гипоксическая тренировка приводит к лучшей переносимости клетками дефицита кислорода в ходе ишемии и в начальных периодах реперфузии [1]. В 1964 году Janoff назвал этот феномен прекондиционированием или толерантностью.

Ишемическим прекондиционированием на­зывают воздействие кратковременной ишемии (2-15 мин) и реперфузии (5-10 мин) на орган- мишень (головной мозг, сердце) перед модели­рованием длительной ишемии [2]. Детальное изучение механизмов действия ишемического прекондиционирования на аффекторную клетку выявило основной путь реализации этого фено­мена. Это активация митохондриальных и рети­кулярных АТФ зависимых K+ каналов посредством активации рецепторов аденозина 1 типа [3]. Другая интересная гипотеза возникла на основе концепции стимуляции эндогенного защитно­го механизма. Прекондиционирование вызы­вает экспрессию эндогенных антиоксидантных ферментов (GSHPx-1) и белков теплового шока HSP27, HSP32 и HSP70. Кроме этого прекондиционирование формирует каскад преобразования сигналов, подавляя сигналы гибели и активируя сигналы выживания [1, 4]. Следовательно, весь­ма вероятно, что некоторые проапоптозные и антиапоптозные гены и факторы матричного анали­за (в том числе JNK-1, c-Jun, NF-κB и АР-1) играют весьма важную роль в процессе прекондиционирования (подобно роли окиси азота).

Огромную роль во вторичных повреждениях ткани при воздействии ишемии играют так назы­ваемые реперфузионные повреждения [5]. Было установлено, что возобновление кровотока в си­стеме сосудов органа после перенесенного эпи­зода ишемии приводит к еще большему усиле­нию клеточного повреждения за счёт активации оксидантного и нитрозативного стресса [6, 7].

Было показано положительное влияние прекондиционирования на развитие реперфузионных осложнений [8, 9]. Однако в реальной жизни не­возможно заранее знать время начала процесса. Поэтому исследования последних лет акцентируют свое внимание на феномене ишемического пост­кондиционирования.

Основная масса работ посвящена исследова­нию феномена прекондиционирования в кардио­логии, неврологии, хирургии, в том числе и в уроло­гии, однако полученные результаты проведенных работ ещё далеки от желаемых. При этом остаётся неисследованной возможность коррекции ише­мических нарушений при операциях на почке в условиях тепловой ишемии Одним из ключевых звеньев в патогенезе острого реперфузионного по­вреждения является дисфункция эндотелия в этот период, что проявляется нарушением микроцирку­ляции в органе. В связи с этим целью настоящей работы явилось изучение микроциркуляции почки и возможности коррекции ее нарушений препаратами из группы ингибиторов фосфодиэстеразы 5 типа в ранний и поздний реперфузионные периоды.

Материалы и методы

Опыты были выполнены на 100 крысах сам­цах линии «Wistar» массой 250-300 гр. Распреде­ление животных осуществлялось рандомизаци­ей по массе, каждая рандомизированная группа состояла не менее, чем из 10 крыс. Для проведе­ния эксперимента отобраны крысы, прошедшие 14-дневный карантинный режим в условиях ви­вария, без внешних признаков наличия болезни. Условиями содержания животных в течение про­ведения исследований были: стандартная экс­периментальная биологически чистая комната, по 12 часов нахождения в темном и светлом ре­жиме освещения за сутки, температура воздуха 22-24 °С. Крысы получали гранулированный корм и фильтрованную водопроводную воду. Экспери­менты проводились во второй половине дня в соответствии с положениями из «Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 18.03.1986 г.). Для наркоза использо­вали хлоралгидрат (300 мг/кг внутрибрюшинно).

Дистантное ишемическое прекондициони- рование осуществляли при помощи наложения эластичного жгута на верхнюю треть контрла­терального бедра на 10 минут с последующей реперфузией в течение 30 минут перед непо­средственным моделированием ишемии почки. Отсутствие пульсации артерий нижней конечно­сти, появление бледности и синюшности кожи яв­лялось контролем эффективности манипуляции.

Ингибиторы фосфодиэстеразы-5 силденафил и тадалафил вводили внутрибрюшинно в дозе 4 мг/кг и 1 мг/кг массы животного соответствен­но с учетом межвидового пересчета доз на 10% диметилсульфоксиде за 30 минут до моделиро­вания ишемии-реперфузии почек.

Блокатор АТФ зависимых К+ каналов глибенкламид (Sigma) вводили внутрибрюшинно в дозе 5 мг/кг веса на 10% диметилсульфоксиде за 30 минут до проведения дистантного ише­мического прекондиционирования и/или вве­дения изученных препаратов. Моделирование ADMA-подобного состояния производили пред­варительным введением ADMA-подобного агента - неселективного блокатора NO-синтазы N-нитро- L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг/сут. Далее моделировали ишемическое и реперфузионное повреждение почек. Животное фиксировали, лёжа на спине, удаляли шерсть и об­рабатывали кожу антисептиками. Доступ к почкам осуществлялся лапаротомически, производили вскрытие брюшной полости, петли кишечника и брыжейка смещались в левую сторону, затем мобилизировалась почка и сосудистая ножка, накла­дывался атравматичный сосудистый зажим на 30 минут. Аналогичную манипуляцию проводили на левой почке. Критерием достаточного пережатия почечной ножки служило изменение цвета органа с красного на темно-красный. Вслед за этим, почки покрывали смоченной антисептиками салфеткой и погружали в рану. Через 30 минут производили выведение органов в рану, снятие зажимов и за­пуск реперфузионного периода длительностью 40 минут. Визуально определяли макроскопическое состояние поверхности почки.

Оценку уровня микроциркуляции произво­дили при помощи аппарата для электрофизио- логических исследований МР150, производства «БИОПАК Системс, Инк» (США) в комплекте с модулями лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) и инвазивного игольчатого датчика TSD144. Игольчатые датчики устанавливали в пяти точках на поверхности почки. Уровень микроциркуля­ции выражался в перфузионных единицах (ПЕд). Запись и обработку результатов ЛДФ выполняли с помощью программы AcqKnowledge, версия 3.8.1. В соответствии с протоколом исследова­ния измерения уровня микроциркуляции произ­водили через 40 минут от начала реперфузионного периода и спустя двое суток после снятия зажима. Для оценки функционального состояния почки через сутки после реперфузии, согласно дизайну эксперимента, животных помещали в метаболические клетки на 24 часа с целью сбора суточной мочи. Затем, измеряли суточный диу­рез и определяли концентрацию креатинина в моче и плазме крови. За скорость клубочковой фильтрации принят клиренс креатинина, рассчи­танный по формуле.

Экспрессию эндотелиальной NO-синтазы (eNOS) определяли иммуногистохимическим методом. Описательное исследование гистоло­гических и иммуногистохимических препаратов выполняли под микроскопом Axio Scope Al (Carl Zeiss Microimaging GMbH, Германия).

Для всех данных была применена описа­тельная статистика: данные проверены на нор­мальность распределения. Тип распределения определялся критерием Шапиро-Уилка. В случае нормального распределения были подсчитаны среднее значение (M) и стандартная ошибка сред­него (m). Межгрупповые различия анализирова­лись параметрическими (t-критерий Стьюдента) или непараметрическими (критерий Манна-Уит­ни) методами, в зависимости от типа распреде­ления. Все расчеты выполнены с помощью пакета статистических программ Microsoft Excel 7.0.

Результаты и обсуждение

Оценка уровня микроциркуляции в почках и экспрессия eNOS. После моделирования пато­логии через 40 минут и 48 часов осуществляли измерение микроциркуляции методом ЛДФ. Ре­зультаты представлены в таблице 1. Показатели микроциркуляции в почках у интактных животных составили 814,66±63,22 ПЕд. В группе животных с 30-минутной ишемией почек через 40 минут по­сле снятия зажима с сосудистой ножки отмечалось выраженное увеличение микроциркуляции до 2069,51±71,99 ПЕд, что достоверно выше показа­телей в группе интактных животных. Данное по­вышение показателя свидетельствует о развитии реактивной гиперемии. Применение дистантного ишемического прекондиционирования (ДИП) и ин­гибиторов фосфодиэстеразы 5 типа (иФДЭ-5) сил­денафила и тадалафила приводило к уменьшению уровня микроциркуляции через 40 минут после снятия зажима по сравнению с контрольной груп­пой и составило 1306,01±101,17 ПЕд, 1235,17±77,66 ПЕд и 1330,73±93,72 ПЕд соответственно.

Введение блокатора АТФ зависимых К+ кана­лов - глибенкламида до моделирования ишемии практически не влияло на уровень микроцирку­ляции через 40 минут после снятия зажима, кото­рый составил 2114,76±73,20 ПЕд. С другой сторо­ны, после 30 минутного моделирования ишемии при применении дистантного ишемического прекондиционирования и фармакологического пре­кондиционирования иФДЭ-5 в сочетании с глибенкламидом уровень микроциркуляции для ДИП составил 1712,31±117,02 ПЕд, для силде­нафила 1813,04±132,57 ПЕд, для тадалафила - 1946,92±93,92 ПЕд. Таким образом подтвержда­ется гипотеза о вовлечении АТФ зависимых К+ каналов в реализацию ренопротектинвых эффек­тов дистантного ишемического прекондиционирования и фармакологического прекондиционирования иФДЭ-5, силденафилом и тадалафилом.

Сочетание моделирования ишемии с L-NAME-индуцированным дефицитом оксида азота не показало существенной разницы в по­казателях микроциркуляции через 40 минут по сравнению с группой животных, которым L-NAME предварительно не вводился. Моде­лирование 30-минутной ишемии, применение ДИП и иФДЭ-5 в сочетании с введением L-NAME привело к статистически достоверному сниже­нию микроциркуляции в сравнении с группой животных с предварительным введением инги­битора NO-синтазы, но без применения ДИП и фармакологического прекондиционирования.

Так, в группе с применением ДИП показатели микроциркуляции через 40 минут после возоб­новления кровотока составили 1152,68 ± 56,90 ПЕд, с применением силденафила - 1248,07 ± 59,28 ПЕд, тадалафила - 1378,18 ± 79,88 ПЕд. На вторые сутки после возобновления кровотока в группе с 30-минутной ишемией уровень микро­циркуляции резко снизился до 316,77±25,29 ПЕд. Коррекция дистантным ишемическим и фарма­кологическим прекондиционированием силде­нафилом и тадалафилом приводила к нормали­зации показателей микроциркуляции в почечной ткани до 588,37±44,15 ПЕд, 701,59±55,35 ПЕд и 632,55±67,81 ПЕд соответственно. При этом, по­лученные результаты достоверно отличались от показателей микроциркуляции в группе интактных животных и группе с моделированием ишемии. Следует отметить, что предваритель­ное введение глибенкламида до моделирования ишемии не приводило к статистически значимо­му снижению уровня микроциркуляции в ткани почек, который составил 273,70±18,30 ПЕд. Вве­дение глибенкламида нивелировало выражен­ные ренопротективные эффекты дистантного ишемического и фармакологического преконди - ционирования. Уровень микроциркуляции был достоверно лучше группы с моделированием 30-минутной ишемии лишь в группе тадалафила (406,21±35,18).

Сочетание моделирования ишемии с L-NAME- индуцированным дефицитом оксида азота не показало существенной разницы в показателях микроциркуляции через 48 часов реперфузии по сравнению с группой животных, которым L- NAME предварительно не вводился. На вторые сутки исследования показатели микроциркуля­ции при применении ДИП, силденафила и тада­лафила и предварительного введения L-NAME оказались достоверно ниже относительно тако­вых без введения блокатора NO-синтазы и со­ставили 350,69±29,18 ПЕд, 372,00±33,73 ПЕд, 302,20±23,62 ПЕд соответственно.

Экспрессия eNOS, определяемая удельной пло­щадью иммунореактивного вещества в эндотелии сосудов коркового вещества почки у интактных животных составила 18,75±1,70% (табл. 1). Через двое суток после моделирования ишемии экс­прессия eNOS в клубочках значительно снижена - 4,55±1,10%. На фоне применения ДИП отмечался некоторый позитивный эффект, среднее значение экспрессии eNOS составляло 9,10±1,05%, что в 2 раза выше значения при моделировании ишемии. Введение ингибиторов фосфодиэстеразы-5 спо­собствовало выраженному росту экспрессии eNOS по сравнению с контрольной группой и составило 16,48±1,49% и 14,10±1,13% для силденафила и тадалафила соответственно. При фармакологическом контроле блокатором АТФ-зависимых калиевых ка­налов глибенкламидом на фоне дистантного ише­мического прекондиционирования отмечалось снижение экспрессии eNOS, как и в случае фар­макологического прекондиционирования силде­нафилом и тадалафилом, до уровня 6,20±0,90%, 13,46±1,40% и 11,38±1,15% соответственно. На фоне введения L-NAME отмечалось ещё более вы­раженное уменьшение экспрессии eNOS, при ДИП экспрессия составила 4,46±0,77%, при введении силденафила 9,96±1,08%, тадалафила 7,65±1,04%.

 

Таблица 1. Оценка уровня микроциркуляции в почках крыс через 40 минут и на вторые сутки после моделирования ишемии

Table 1. Evaluation of microcirculation level in the rats' kidneys after 40 minutes and on the second day after ischemia modeling

Группы животных 

Groups of laboratory animals

Микроциркуляция, ПЕд

Microcirculation, Perfusion Units

Экспрессия eNOS, %

Expression of eNOS, %

40 минут

40 minutes

2 сутки

Second day

2 сутки

Second day

Интактные

Intact

814,66±63,22

898,28±72,64

18,75±1,70

Ишемия

Ischemia

2069,51±71,99*

316,77±25,29*

4,55±1,10*

Ишемия+ДИП

Ischemia + Distant Ischemic Preconditioning

1306,01±101,17x

588,37±44,15*x

9,10±1,05*x

Ишемия + Силденафил

Ischemia + Sildenafil

1235,17±77,66x

701,59±55,35*x

16,48±1,49*x

Ишемия + Тадалафил

Ischemia + Tadalafil

1330,73±93,72x

632,55±67,81*x

14,10±1,13*x

Ишемия + Глибенкламид

Ischemia + Glibenclamide

2114,76±73,20*

273,70±18,30*

4,00±1,02*

Ишемия + ДИП + Глибенкламид

Ischemia + Distant Ischemic Preconditioning + Glibenclamide

1712,31±117,02у

428,59±47,42у

6,20±0,90у

Ишемия + Силденафил + Глибенкламид

Ischemia + Sildenafil + Glibenclamide

1813,04±132,57у

459,55±40,74у

13,46±1,40у

Ишемия + Тадалафил + Глибенкламид

Ischemia + Tadalafil + Glibenclamide

1946,92±93,92у

406,21±35,18xy

11,38±1,15xy

Ишемия + L-NAME

Ischemia + N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME)

2083,44±74,3*

226,78±23,29*

2,92±1,09*

Ишемия + ДИП + L-NAME

 Ischemia + Distant Ischemic Preconditioning + N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME)

1152,68±56,90z

350,69±29,18z

4,46±0,77z

Ишемия + Силденафил + L-NAME

Ischemia + Sildenafil + N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME)

1248,07±59,28z

372,00±33,73z

9,96±1,08z

Ишемия + Тадалафил + L-NAME

Ischemia + Tadalafil + N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME)

1378,18±79,88z

302,20±23,62z

7,65±1,04z

Примечание:

* – р <0,05 в сравнении с группой интактных;

x - р <0,05 в сравнении с группой животных с 30-минутной ишемией;

у - р <0,05 в сравнении с группой животных с 30-минутной ишемией и предварительным введением глибенкламида;

z - р <0,05 в сравнении с группой животных с 30-минутной ишемией и предварительным введением L-NAME.

Comment:

* – р <0.05 in comparison with the group of intact;

x - p <0.05 in comparison with the group of animals after 30-minute ischemia;

y - p <0,05 in comparison with group of animals after 30-minute ischemia and preliminary introduction of Glibenclamide; z - p <0.05 in comparison with the group of animals after 30-minute ischemia and preliminary introduction of N-nitro-L-arginine- methyl ester (L-NAME).

 

Таблица 2. Показатели функционального состояния почек (М±т)

Table 2. Indices of the kidneys functional state (M±m)

Группы животных

Groups of laboratory animals

Креатинин, мкмоль /л

Creatinine, μmol / L

СКФ, мл/мин

Glomerular filtration rate,
ml / min

Интактные

Intact

73,4±4,27

1,27±0,04

Ишемия

Ischemia

141,9±11,09*

0,69±0,06*

Ишемия+ДИП

Ischemia + Distant Ischemic Preconditioning

109,3±7,16*x

0,81±0,08*x

Ишемия + Силденафил

Ischemia + Sildenafil

98,6±6,08*x

0,96±0,09*x

Ишемия + Тадалафил

Ischemia + Tadalafil

87,5±4,97x

1,16±0,04x

Ишемия + Глибенкламид

Ischemia + Glibenclamide

152±5,37*

0,51±0,07*

Ишемия + ДИП + Глибенкламид

Ischemia + Distant Ischemic Preconditioning + Glibenclamide

133,7±5,4у

0,76±0,1*

Ишемия + Силденафил + Глибенкламид

Ischemia + Sildenafil + Glibenclamide

131,7±4,67у

0,77±0,07*

Ишемия + Тадалафил + Глибенкламид

Ischemia + Tadalafil + Glibenclamide

129,6±6,25xy

0,82±0,06*

Ишемия + L-NAME

Ischemia + N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME)

166,8±7,79*x

0,43±0,05x

Ишемия + ДИП + L-NAME

Ischemia + Distant Ischemic Preconditioning + N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME)

130±4,19z

0,76±0,06z

Ишемия + Силденафил + L-NAME

Ischemia + Sildenafil + N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME)

115,5±6,26z

0,74±0,1z

Ишемия + Тадалафил + L-NAME

Ischemia + Tadalafil + N-nitro-L-arginine-methyl ester (L-NAME)

122,2±6,29z

0,79±0,07z

Примечание:

* – р <0,05 в сравнении с группой интактных;

x - р <0,05 в сравнении с группой животных с 30-минутной ишемией;

у - р <0,05 в сравнении с группой животных с 30-минутной ишемией и предварительным введением глибенкламида; z - р <0,05 в сравнении с группой животных с 30-минутной ишемией и предварительным введением L-NAME.

Comment:

* – р <0.05 in comparison with the group of intact;

x - p <0.05 in comparison with the group of animals after 30-minute ischemia;

y - p <0,05 in comparison with group of animals after 30-minute ischemia and preliminary introduction of Glibenclamide; z - p <0.05 in comparison with the group of animals after 30-minute ischemia and preliminary introduction of N-nitro-L-arginine- methyl ester (L-NAME).

 

Оценка функционального состояния почек. Результаты, полученные в ходе оценки функцио­нального состояния почек представлены в табли­це 2. В контрольной группе животных с ишемиче­скими и реперфузионными повреждениями почек концентрация креатинина повышалась в 1,9 раз по сравнению с данными интактной группы, что соответствует критериям острого почечного повреж­дения. Применение дистантного ишемического прекондиционирования снижало концентрацию креатинина до 109,3±7,16 мкмоль/л. Применение силденафила и тадалафила также способствовало снижению концентрации креатинина до 98,6±6,08 и 87,5±4,97мкмоль/л соответственно. Однако, лишь применение тадалафила позволяло норма­лизовать данный показатель до значений, не от­личавшихся статистически от уровня креатинина интактных животных.

Применение глибенкламида, блокатора АТФ- зависимых калиевых каналов, не усугубляло тече­ние ишемии-реперфузии, однако нивелировало положительные ренопротективные эффекты ДИП, силденафила и тадалафила. Значение уровня креатинина находилось на уровне 133,7±5,4 мкмоль/л, 131,7±4,67 мкмоль/л, 129,6±6,25 мкмоль/л соот­ветственно и не отличалось от группы животных с изолированным моделированием 30-минутной ишемии, за исключением группы тадалафила. До­полнительное моделирование дефицита оксида азота с помощью L-NAME приводило к значитель­ному усугублению острого почечного повреждения по показателю креатинина, концентрация в плазме крови которого составила 166,8±7,79, что соответ­ствует более тяжелой степени почечной недоста­точности. Коррекция дистантным ишемическим и фармакологическим прекондиционированием с использованием силденафила и тадалафила при­вела к незначительному снижению уровня креатинина до 130±4,19 мкмоль/л, 115,5±6,26 мкмоль/л, 122,2±6,29 мкмоль/л соответственно. Данные, приведенные в таблице 2, указывают, что ише­мия и реперфузия почек сопровождаются резко выраженным снижением скорости клубочковой фильтрации; так у крыс с моделированием билате­ральной ишемии СКФ на вторые сутки наблюдения снижалась в 1,8 раз по сравнению с интактными животными. На фоне применения дистантного ишемического и фармакологического прекондиционирования силденафилом отмечалось незна­чительное улучшение функции почек, о чем сви­детельствует повышение среднего значения СКФ до 0,81±0,08 мл/мин и 0,96±0,09 мл/мин соответ­ственно. Фармакологическая коррекция ишеми­ческих и реперфузионных повреждений тадалафилом достоверно повышало показатели СКФ до 1,16±0,04 мл/мин, что свидетельствует о наиболее высоком ренопротективном потенциале. Блокада ключевой мишени для потенциальных фармаколо­гических агентов глибенкламидом, не приводила к усугублению функциональных маркеров почечной недостаточности, однако не позволяла реализо­вывать ренопротективные эффекты ДИП, силде­нафила и тадалафила. В подтверждение гипотезы об усугублении течения почечного повреждения наличием коморбидной ADMA-ассоциированной патологии, средний показатель СКФ на фоне пред­варительного введения L-NAME составил 0,43±0,05 мл/мин. Применение дистантного ишемического и фармакологического прекондиционирования ингибиторами фосфодиэстеразы силденафилом и тадалафилом на фоне блокады NO-синтазы позволило восстановить показатель СКФ до значений жи­вотных из группы с моделированием 30-минутной ишемии.

Заключение

Применение дистантного ишемического и фармакологического прекондиционирования ин­гибиторами фосфодиэстеразы 5 типа силденафи­лом и тадалафилом дает протективный эффект, выражающийся в улучшении показателей микро­циркуляции и функционального состояния почки при её «тепловой ишемии». В реализации поло­жительных эффектов дистантного ишемического и фармакологического прекондиционирования при «тепловой ишемии» почки значительную роль играет активация АТФ-зависимых К+ каналов. В условиях ADMA-подобного состояния (дефицит ок­сида азота в результате ингибирования eNOS вве­дением L-NAME) расстройства микроциркуляции и функционального состояния почки при «тепло­вой ишемии» более выражены, а положительные эффекты дистантного ишемического и фармако­логического прекондиционирования снижаются.

Список литературы

1. Лихванцев В.В., Мороз В.В., Гребенчиков О.А., Гороховатский Ю.И., Заржецкий Ю.В., Тимошин С.С., Левиков Д.И., Шайбакова В.Л. Ишемическое и фармакологическое прекондиционирование. Общая реаниматология. 2011;7(6):59. DOI: 10.15360/1813-9779-2011-6-59

2. Маслов Л.Н. Новые подходы к профилактике и терапии ишемических и реперфузионных повреждений сердца при остром инфаркте миокарда. Сибирский медицинский журнал. 2010;25(2-1):17–24.

3. Cohen MV, Baines CP, Downey JM. Ischemic preconditioning: from adenosine receptor to KATP. Annual Review of Physiology. 2000;62:79-109. DOI: 10.1146/annurev.physiol.62.1.79

4. Hausenloy DJ, Tsang A, Mocanu MM, Yellon DM. Ischemic preconditioning protects by activating prosurvival kinases at reperfusion. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2005;288(2):H971-6. DOI: 10.1152/ajpheart.00374.2004

5. Inserte J, Barrabés JA, Hernando V, Garcia-Dorado D. Orphan targets for reperfusion injury. Cardiovasc Res. 2009;83(2):169-78. DOI: 10.1093/cvr/cvp109

6. Perrelli MG, Pagliaro P, Penna C. Ischemia/reperfusion injury and cardioprotective mechanisms: Role of mitochondria and reactive oxygen species. World J Cardiol. 2011;3(6):186-200. DOI: 10.4330/wjc.v3.i6.186

7. Ruiz-Meana M, García-Dorado D. Pathophysiology of ischemia-reperfusion injury: new therapeutic options for acute myocardial infarction. Revista Española de Cardiología. 2009;62(2):199–209. DOI: 10.1016/S1885-5857(09)71538-5

8. Ragulina VA, Kostina DA, Dovgan AP, Burda YE, Nadezhdin SV. Nuclear factor kappa B as a potential target for pharmacological correction endothelium-associated pathology. Research result: pharmacology and clinical pharmacology. 2017;3(1):114-124. DOI: 10.18413/2500-235X-2017-3-1-114-124

9. Danilenko LM, Klochkova GN, Kizilova IV, Korokin MV. Pharmacological preconditioning by recombinant erythropoietin as the possibility of increasing the stability of tissue of the retina to reperfusion ischemia in experiment. Research result: pharmacology and clinical pharmacology. 2016;2(3):95-100. DOI: 10.18413/2500-235X-2016-2-3-95-100


Об авторах

О. И. Братчиков
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» МЗ РФ
Россия

Братчиков Олег Иванович – д.м.н., профессор, заведующий, кафедра урологии 



М. В. Покровский
ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» Минобрнауки РФ, Медицинский институт
Россия

Покровский Михаил Владимирович – д.м.н., профессор, заведующий, кафедра фармакологии и клинической фармакологии

директор 



В. В. Елагин
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» МЗ РФ
Россия

Елагин Владислав Викторович – ассистент, кафедра урологии  

тел.: +7 (919) 219-02-85



Д. А. Костина
ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» Минобрнауки РФ, Медицинский институт
Россия

Костина Дарья Александровна – ассистент, кафедра фармакологии и клинической фармакологии 



Для цитирования:


Братчиков О.И., Покровский М.В., Елагин В.В., Костина Д.А. КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ ФУНКЦИИ ЭНДОТЕЛИЯ В ПОЧКЕ ДИСТАНТНЫМ ИШЕМИЧЕСКИМ И ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИМ ПРЕКОНДИЦИОНИРОВАНИЕМ ПРИ ТЕПЛОВОЙ ИШЕМИИ. Вестник урологии. 2018;6(2):4-12. https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-2-4-12

For citation:


Bratchikov O.I., Pokrovskiy M.V., Elagin V.V., Kostina D.A. THE CORRECTION OF ENDOTHELIAL DYSFUNCTION WITH THE HELP OF DISTANT ISCHEMIC AND PHARMACOLOGICAL PRECONDITIONING WITH THERMAL LOCAL ASPHYXIA OF KIDNEY. Urology Herald. 2018;6(2):4-12. (In Russ.) https://doi.org/10.21886/2308-6424-2018-6-2-4-12

Просмотров: 340


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2308-6424 (Online)